利(lì)用發酵(jiào)，收(shōu)集酵母菌(jūn)體(tǐ)，用(yòng)去(qù)離子水(shuǐ)清洗三(sān)次(cì)，然(rán)後用含有不同(tóng)金屬離子和凍幹(gān)保(bǎo)護(hù)劑的(dí)磷(lín)酸(suān)鹽緩衝(chōng)液重懸(50 mmol/L，pH 8.0)，在經過預處理(lǐ)後，通過(guò)凍幹(gān)機(jī)真空冷凍(dòng)幹燥可得(dé)到展示 RML 的畢赤(chì)酵(jiào)母全(quán)細胞(bāo)粉。

    凍(dòng)幹機真空冷凍(dòng)幹(gān)燥前(qián)在菌(jūn)懸液(yè)中(zhōng)添(tiān)加(jiā)一(yī)些保(bǎo)護(hù)劑，如(rú)山梨醇，蔗(zhè)糖(táng)，果(guǒ)糖，海藻糖，葡(pú)萄(táo)糖，聚乙(yǐ)二醇(chún)，甘油(yóu)等，能(néng)提高其活(huó)性和穩(wěn)定性。這些物質在凍幹過(guò)程(chéng)中(zhōng)其(qí)羥(qiǎng)基可(kě)與蛋(dàn)白(bái)質中的(dí)極性基團形成(chéng)氫鍵，代替蛋白(bái)質極性基團周圍的水(shuǐ)分(fēn)子，使(shǐ)蛋白(bái)質表麵形(xíng)成一層假(jiǎ)定的(dí)水化膜，保(bǎo)護(hù)氫鍵的連接位置(zhì)不直(zhí)接(jiē)暴露在(zài)周圍環境中，穩(wěn)定蛋白質的結(jié)構，防止其(qí)因凍幹(gān)而變性(xìng)。

    因此而知海(hǎi)藻糖，果(guǒ)糖(táng)和山(shān)梨醇(chún)等物質(zhì)在凍幹(gān)過程中(zhōng)能減少(shǎo)酶(méi)蛋白(bái)的變性(xìng)，從而提(tí)高(gāo)該酶的合成活力。與(yǔ)未處(chǔ)理(lǐ)的全(quán)細胞酶粉(fěn)相比(bǐ)，凍幹(gān)中(zhōng)加入這三種物質後，合(hé)成活(huó)力分(fēn)別(bié)提高(gāo) 17%，20.29%和 20.72%。

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