隨著(zhuó)超低(dī)溫(wēn)冰(bīng)箱(xiāng)技(jì)術的不斷(duàn)發展(zhǎn)
，超(chāo)低溫冰箱在醫用(yòng)領域(yù)也逐(zhú)漸被廣(guǎng)泛(fàn)應(yīng)用。例(lì)如(rú)-86℃低溫冰箱在冰(bīng)凍切(qiē)片上的(dí)應用(yòng)
，那就(jiù)是(shì)冰(bīng)凍(dòng)切片(piàn)環(huán)節中速(sù)凍
，以減少(shǎo)冰晶形成。

    免(miǎn)疫(yì)組織(zhī)化(huà)學染色(sè)中zui常(cháng)用(yòng)的(dí)一種切(qiē)片方法
，就是(shì)冰(bīng)凍(dòng)切片。它(tā)zui突(tū)出(chū)的(dí)優點(diǎn)
，就是(shì)能夠較完好(hǎo)地(dì)保存多(duō)種(zhǒng)抗(kàng)原(yuán)的(dí)免疫(yì)活性(xìng)
，尤(yóu)其(qí)是細(xì)胞(bāo)表麵抗原(yuán)
，更應(yīng)采(cǎi)用冰凍(dòng)切(qiē)片(piàn)。新(xīn)鮮的組織及已(yǐ)固(gù)定(dìng)的組織均可作冰(bīng)凍(dòng)切片。冰凍時(shí)
，組織中(zhōng)水(shuǐ)份(fèn)易(yì)形成冰晶
，往往影(yǐng)響(xiǎng)抗原定位(wèi)。一般(bān)認為冰(bīng)晶(jīng)少(shǎo)而大(dà)時(shí)
，影響(xiǎng)較小
，冰晶小而(ér)多(duō)時(shí)
，對組織結(jié)構損害(hài)較大
，在含(hán)水量(liáng)較(jiào)多(duō)的組織中上(shàng)述現象更(gēng)易(yì)發(fā)生(shēng)。冰晶(jīng)的(dí)大小與(yǔ)其生(shēng)長速率(shuài)成正比
，而與成核(hé)率（形(xíng)成速率）成反比
，即冰(bīng)晶形成(chéng)的(dí)數(shù)量愈(yù)多則愈小
，對組織(zhī)結構(gòu)影響(xiǎng)愈嚴重。因(yīn)此(cǐ)
，應(yīng)盡量降低冰晶(jīng)的數(shù)量。Fish認為冰(bīng)凍開始時
，冰晶成核(hé)率(shuài)較慢
，以後(hòu)逐漸(jiàn)增(zēng)加
，其臨(lín)界溫度為-33℃
，從-30℃降(jiàng)至-43℃之間(jiān)
，成核率(shuài)急劇增(zēng)加達(dá)1018
，然後(hòu)再減慢。基於上述(shù)理論可采取以下措(cuò)施(shī)減少冰(bīng)晶(jīng)的(dí)形成(chéng)。

（1）速(sù)凍
，使組(zǔ)織溫(wēn)度驟(zhòu)降
，縮短(duǎn)從(cóng)-33℃到(dào)-43℃的(dí)時(shí)間
，減少(shǎo)冰(bīng)晶的形(xíng)成。

其(qí)方法(fǎ)有二：

①幹(gān)冰(bīng)-丙(bǐng)酮（酒精）法(fǎ)：將150-200ml丙酮(tóng)（酒(jiǔ)精）裝入小保溫(wēn)杯內
，逐漸加(jiā)入(rù)幹冰(bīng)
，直(zhí)至(zhì)飽(bǎo)和呈(chéng)粘(nián)稠狀
，再加(jiā)幹冰不再昌(chāng)泡時(shí)
，溫(wēn)度(dù)可(kě)達(dá)-70℃
，用(yòng)一小燒(shāo)杯(bēi)（50-100ml）內裝異(yì)戊烷(wán)約(yuē)50ml
，再(zài)將燒杯(bēi)緩慢置(zhì)入幹(gān)冰(bīng)丙(bǐng)酮（純酒精）飽(bǎo)和液(yè)內(nèi)
，至(zhì)異(yì)戊烷溫度達-70℃時即(jí)可(kě)使(shǐ)用。將組織（大(dà)小為1cm×0.8cm×0.5cm）投(tóu)入(rù)異戊(wù)烷(wán)內(nèi)速凍30-60s後取出(chū)
，或(huò)置恒(héng)冷(lěng)箱內(nèi)以(yǐ)備切片
，或置-86℃低溫(wēn)冰箱(xiāng)內(nèi)貯存(cún)。

②液氮(dàn)法(fǎ)：將(jiāng)組織塊平(píng)放於軟(ruǎn)塑瓶(píng)蓋或特製小(xiǎo)盒內（直徑約(yuē)2cm）
，如(rú)組織塊(kuài)小可適量(liáng)加OCT包(bāo)埋劑(jì)浸沒組織
，然後將特(tè)製(zhì)小盒緩緩平放入(rù)盛有液氮的小(xiǎo)杯(bēi)內(nèi)
，當盒底(dǐ)部(bù)接觸液氮時即(jí)開(kāi)始氣(qì)化(huà)沸(fèi)騰
，此時小盒保持(chí)原位(wèi)切勿浸(jìn)入(rù)液(yè)氮中
，大(dà)約(yuē)10-20s組織(zhī)即(jí)迅速(sù)冰結成(chéng)塊。取出組織(zhī)冰塊立即置入(rù)-86℃低(dī)溫(wēn)冰箱(xiāng)貯存(cún)備用
，或置入恒冷箱(xiāng)切(qiē)片機(jī)冰凍切片。

-86℃低(dī)溫冰箱(xiāng)參數(shù)：

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