細(xì)菌冷(lěng)凍(dòng)幹(gān)燥機顧(gù)名思(sī)義是一種用於細菌(jūn)，菌種，微生(shēng)物(wù)等凍幹保存(cún)的真空冷(lěng)凍幹(gān)燥(zào)機(jī)
，也常(cháng)常被(bèi)稱(chēng)為細菌凍(dòng)幹機，菌種冷凍(dòng)幹燥機(jī)，微生物(wù)冷(lěng)凍(dòng)幹(gān)燥(zào)機。其操(cāo)作步(bù)驟(zhòu)如下
：

一，菌株準備及分裝(zhuāng)

    液體培(péi)養的菌(jūn)種
，經(jīng)離(lí)心(xīn)收集和用生(shēng)理鹽水洗滌細胞(bāo)
，收集的菌體(tǐ)用保護(hù)劑（10ml脫脂牛(niú)奶(nǎi)中加(jiā)1g米孢子粒）懸(xuán)浮製(zhì)成菌懸浮液(yè)。懸液(yè)中菌(jūn)數(shù)要(yào)求(qiú)達到108-1010個/ml為(wéi)宜(yí)。懸液(yè)製備完(wán)成盡(jìn)快分裝(zhuāng)和凍(dòng)結。分(fēn)裝安(ān)瓿(bù)時可(kě)用滅(miè)菌長嘴毛吸(xī)管或長(cháng)針注(zhù)射器
，每(měi)管(guǎn)分裝量約(yuē)0.1-0.2ml（0.3-0.5ml
，單(dān)管式冷(lěng)凍管(guǎn)球形裝液區(qū)內的(dí)裝液量應為球體(tǐ)積(jī)的(dí)一半(bàn)左右）
，分(fēn)裝安(ān)瓿管時間盡(jìn)量(liáng)要短(duǎn)
，在1-2小(xiǎo)時(shí)內分裝完(wán)畢並(bìng)且預凍(dòng)
，分裝(zhuāng)時(shí)應注意在無菌條件下操(cāo)作。

二(èr)，預凍(dòng)

    置(zhì)於(yú)-80℃超(chāo)低(dī)溫冰箱(xiāng)預凍(dòng)1-2小(xiǎo)時(shí)（也(yě)可(kě)直接(jiē)選(xuǎn)購-80℃低溫實(shí)驗室冷(lěng)凍幹(gān)燥機(jī)）。

三(sān)， 冷凍幹(gān)燥

1. 將冷(lěng)凍(dòng)後(hòu)的樣(yàng)品(pǐn)安(ān)瓿管置於(yú)細菌冷凍(dòng)幹燥機上(shàng)（先(xiān)開(kāi)機(jī)預冷30分(fēn)鐘以(yǐ)上(shàng)才(cái)開(kāi)泵(bèng)）
，開始冷凍(dòng)幹燥
，時間(jiān)一般(bān)為數小時(shí)。終(zhōng)止(zhǐ)幹燥時間(jiān)應(yīng)該根據以(yǐ)下情(qíng)況(kuàng)判(pàn)斷
：安瓿(bù)管內凍(dòng)幹物呈(chéng)酥(sū)塊狀或(huò)者鬆散(sàn)狀；真空度接近(jìn)空(kōng)載時的zui高值；選(xuǎn)用1-2支對(duì)照管
，其水(shuǐ)份與菌懸(xuán)液(yè)同(tóng)量(liáng)
，視(shì)為(wéi)幹燥完結。（注意
：確(què)認幹燥(zào)後
，要先(xiān)開(kāi)啟冷(lěng)凍(dòng)室(shì)的(dí)進氣閥(fá)
，讓(ràng)真空釋(shì)放
，然後停(tíng)泵(bèng)
，打開冷凍(dòng)室
，將冷凍(dòng)幹(gān)燥(zào)管取出(chū)。）

2. 真空封(fēng)口

將安瓿管頸部棉塞(sāi)以(yǐ)下處(chǔ)用(yòng)強火(huǒ)焰拉細進行(háng)熔封。

四(sì)， 保藏

   安瓿管保藏(cáng)在-20℃超低溫冰箱(xiāng)中。

五(wǔ)， 活化(huà)

    如(rú)果(guǒ)要(yào)從中(zhōng)取(qǔ)出(chū)菌種恢復(fù)培養(yǎng)
，可(kě)先用75%酒(jiǔ)精(jīng)將管(guǎn)得外壁消(xiāo)毒
，用(yòng)無菌棉簽沾冷(lěng)水(shuǐ)
，在頂部擦一(yī)圈
，頂(dǐng)部出(chū)現(xiàn)裂紋
，用挫(cuò)刀(dāo)或鑷子頸(jǐng)部輕叩(kòu)一下
，敲下(xià)已(yǐ)開裂的(dí)安(ān)瓿管的頂(dǐng)端
，
，在安(ān)瓿(bù)管中加入0.5-1ml液(yè)體(tǐ)培(péi)養基
，慢慢旋(xuán)轉安(ān)瓿(bù)管(guǎn)
，使凍(dòng)幹(gān)菌(jūn)種(zhǒng)復蘇(sū)
，然(rán)後(hòu)直接接(jiē)種到瓊(qióng)脂(zhī)斜麵(miàn)或(huò)塗布平(píng)板(bǎn)。

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